...协同作用.对IEF(isoelectricfocusing)样品的预处理涉及溶解、变性和还原来完全破坏蛋白间的相互作用,并除去如核酸等非蛋白物质.理想的状态是人们应一步完成蛋白的完全处理.而离液剂2mol/L硫脲和表面活性剂4%CHAPS的混合液促使疏...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...TC3′;引物2:5′CGGGATCCTACTTGGAGGCAGTCATG3′。PCR反应条件:94℃变性30s,54℃退火30s,72℃延伸1min。35次循环后,在72℃继续延伸7min。 构建重组质粒:扩增的PCR产物进行酚抽提。将其与pBV220载体分别用EcoRⅠ、BamHⅠ进行双酶切,走低...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...恒温就能完成扩增反应,没有PCR反应中那样循环温模板的变性、退火、复性过程,因此可将PCR法的2-3小时的扩增时间缩短至约1小时,即能扩增出109~1010倍靶序列拷贝,DNA产量高达500ug/mL,且能检测到的拷贝数低至PCR检测限的1/10...
健康行业资讯;食品安全;转基因食品...混合液即可消除PCR产物的残留污染。由于UNG在PCR循环中的变性一步便可被灭活,因此不会影响含dU的新的PCR产物。 (3)dU引物法:合成引物时以dU代dT,这样PCR产物中仅5ˊ端带dU.UNG处理后,引物失去了结合位点而不能扩增。对...
参考资料药品天地;专业药学;实验技术;色谱技术;色谱入门...化包涵体,免疫毒素纯度约在80%以上。免疫毒素经尿素变性、PBS逐级稀释复性处理后,以MTT法检测其对胃癌细胞MGC803的杀伤活性,在细胞毒实验中,采用pIg20-PE38融合蛋白(pIg20-PE38与3H11-PE38唯一不同之处在于起导向作用的载体...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学....如何通过核酸序列推测未知蛋白质的氨基酸序列?7.核酸变性-复性和核酸紫外吸收特性的化学本质及其在生物学研究中的应用?8.PIP2信号传导途径?其第二信使是什么?9.DNA以何种方式复制?如何保证复制的忠实性?10.体内ATP...
参考资料医源资料库;医源习题集;生物化学...列的可靠性和成本效益对于相关应用是至关重要的。尽管脱氧核糖核酸(DNA)微阵列对于基因合成的短寡核苷酸池也是一个划算的来源,但是这些复杂混合物必须经过放大和正确的组装。一项最近的研究描述了一种方法,即将30...
参考资料行业资讯;临床快报;遗传与基因组...度计检测其完整性和浓度。利用随机引物逆转录合成互补脱氧核糖核酸(cDNA),根据HLA-DRw53基因第二外显子序列和管家基因人磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的cDNA序列设计序列特异性引物。检测43例变应性血管炎患者治疗前后与24名...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2007年第7卷第9期...Trp↓)、羟胺(Asn↓Gly)等,不但便宜且有效,往往还可以在变性条件下进行反应。但由于裂解位点的特异性低和可能对目的蛋白产生的不必要修饰,使该法渐渐被酶解法取代。酶解的方法相对来说反应条件较温和,更重要的是,普...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...,加入40uL液体石蜡油覆盖,短暂离心。上述反应管94℃预变性5min,在PE-480PCR扩增仪上做30次循环反应:94℃变性1min,55℃退火1min,72℃延伸1min,最后,72℃终止延伸10min。-20℃保存备用。低熔点凝胶经酚氯仿抽提法回收酯酶B1...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2005年第5卷第2期