...的重组质粒pcDNA3-E溶于灭菌双蒸水100μl,用Tris*Cl饱和酚、氯仿/异戊醇(24∶1)抽提后经3mol/LNaAc(pH5.2)和无水乙醇沉淀,真空抽干,备用。NIH3T3细胞用含1%谷氨酰胺、0.45%NaHCO3和10%胎牛血清的DMEM培养液培养于35mm的培养皿中,37℃培养24...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...分泌物经PBS稀解,离心后沉淀物经蛋白求恩酶K水解,酚/氯仿抽提等处理后与沙眼衣原体探针,如外膜蛋白基因的高度保守序列,或TE-55DNA探针等进行斑点杂交,可检出沙眼衣原体的15个血清型,而与其它细菌,病毒、立克次体等...
词条分类词条分类;化验及医学检查;阴道分泌物检查...分泌物经PBS稀解,离心后沉淀物经蛋白求恩酶K水解,酚/氯仿抽提等处理后与沙眼衣原体探针,如外膜蛋白基因的高度保守序列,或TE-55DNA探针等进行斑点杂交,可检出沙眼衣原体的15个血清型,而与其它细菌,病毒、立克次体等...
词条化验及医学检查...,加100μl10%SDS,37℃10min,然后转入65℃15min。等体积酚、氯仿、异戊醇(V∶V∶V=25∶24∶1)抽提,上清加1/10体积3mol/LNaAc和2倍体积冰冷乙醇沉淀DNA。于含EB的1.5%琼脂糖凝胶中电泳,85V60min,紫外光下拍照记录。 1.7 统计学方...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...实验波长下测定的每孔的光吸收值。 1.5DNA断裂分析酚氯仿法抽提各组胃癌细胞DNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯形条带。 1.6透射电镜观察收集细胞,经戊二醛和四氯化锇固定,梯度酒精脱水,Epon-812包埋,在超薄切片机上切...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华实用医药杂志;2005年第5卷第21期...啉代丙烷磺酸)、去离子甲酰铵购自BBI公司;无水乙醇、氯仿、醋酸钠均为国产分析纯。饱和酚、琼脂糖购自Sangon公司, 1.2方法 1.2.1弓形虫RH株速殖子总RNA的提取及引物 总RNA的提取按试剂盒说明进行,用核酸蛋...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国热带医学杂志;2008年第8卷第4期...烤6hr或更长时间。 2.塑料器皿可用0.1%DEPC水浸泡或用氯仿冲洗(注意:有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀,故不能使用)。 3.有机玻璃的电泳槽等,可先用去污剂洗涤,双蒸水冲洗,乙醇干燥,再浸泡在3%H2O2室温10min,然后用0...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...病毒DNA:取CPE明显时的受感染的CBMC,蛋白酶K消化,酚、氯仿、异戊醇常规方法抽提DNA。引物按Berneman〔2〕的设计合成。HV7:5′-TATCCCAGCTGTTTTCATATAGTAAC-3′(26mer);HV8:5′-GCCTTGCGGTAGCACTAGATTTTTTG-3′(26mer)。循环体系为50μl反应体系,含...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...PCR产物纯化回收[6]后,用大片段Klenow酶室温处理1h;酚/氯仿抽提后,用T4DNA连接酶(20U,16℃孵育24h)使线性DNA分子自身环化,再转化至大肠杆菌TG1,获得的克隆用TM-TNF特异性引物作PCR扩增,并与TM-TNF的PCR产物比较,初步筛选出...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...周静脉血,制成干血滤纸片,-20℃低温保存;用常规酚-氯仿抽提法提取基因组DNA。1.2PCR引物合成由于编码热休克转录因子(heat-shocktranscriptionfactor4,HSF4)基因定位于16q21-q22.1;因此选择了D16S539分子标记,首先进行连锁分析。其上...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代眼科学杂志;2006年第3卷第4期