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  • siRNA对宫颈癌细胞系HPV16E6基因的作用

    ...宫颈癌治疗探索新方。研究者构建HairpinsiRNA质粒,稳定转染宫颈癌SiHa细胞,鉴定转染细胞中的质粒DNA,通过Real-TimeRT-PCR检测细胞中HPV16E6mRNA表达,采用Western-blot检测p53、p21等蛋白的变化。MTT(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色...

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  • 中国研究者探讨EPHA2-siRNA质粒对骨肉瘤细胞生物学行为的影响

    ...研究者应用pSiliencer质粒构建靶向EPHA2的siRNA质粒;脂质体转染siRNA质粒入骨肉瘤细胞,Westernblot在蛋白水平检测转染前后细胞基因表达情况;采用四甲基偶氮唑盐(MTI")、流式细胞仪结合AnnexinV—FITC和PI染色以及HE染色观察转...

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  • 人膀胱癌细胞株T24增殖研究

    ...干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pGenesil-1-Bcl-2siRNA重组质粒,转染T24细胞.采用Westernblot检测重组质粒对Bcl-2蛋白表达的影响,MTT观察重组质粒对T24细胞体外生长的抑制作用,Annexin-V-PI双染流式细胞术(FCM)检测转染重组质粒后细胞的...

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  • 膀胱癌基因治疗方法创新

    ...果鉴定。  该课题应用脂质体Lipofectine将Fas质粒pCMV-Fas转染膀胱癌细胞系EJ后,利用Northernblot、原位杂交、流式细胞术检测膀胱癌细胞的FasmRNA和分子表达。结果显示,脂质体介导的Fas基因转染可明显增强膀胱癌细胞EJ的Fas表达...

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  • 血管内皮细胞系表达的HLA-G1抑制同种T细胞增殖及活性

    ...同种异体T细胞增殖的作用。研究者采用脂质体介导的DNA转染技术,将构建的真核表达质粒pcDNA3-HLA-G1转染ECV304,用免疫荧光检测其表达的HLA-G1分子。将表达HLA-G1的ECV304与同种异体T细胞进行混合细胞培养后,用四甲基偶氮唑(MTT)...

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  • FAS配体(FASL)在COS-7细胞中的表达

    ...构建FASL的真核细胞表达载体PSVL-hFASL,用电击将PSVL-hFASL转染COS-7细胞转染后48h,用Northern-blot检测FASL的表达。结果:转染后COS-7细胞有FASL的mRNA的表达,在COS-7细胞上表达的重组FASL能诱导FAS阳性的U937细胞发生程序性死亡。结...

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  • 基因治胆管癌研究有进展

    ...月06日健康报9大连医科大学附属一院“肿瘤坏死因子基因转染对胆管癌的影响”研究,日前获得了重要进展。该研究从分子生物学上阐释胆管癌的发病机制,研究揭示PLNCX-TNFα基因转染可抑制胆管癌细胞生长增殖能力和促进癌...

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  • 腺病毒介导的HBsAg基因修饰树突状细胞瘤苗对HepG2.2.15肝癌细胞的免疫效应

    ...3细胞包装腺病毒后,收获病毒并做滴度测定,再将AdVHBsAg转染人单核细胞来源的DC构建AdVHBsAg-DC肝癌瘤苗。采用Westernblot鉴定转染基因表达;流式细胞仪检测表面分子;3↑H-胸腺嘧啶核苷(3↑H-TdR)检测T细胞增殖反应的能力...

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  • 细胞因子对小鼠α2(I)型前胶原基因启动子活性影响的研究①

    ...乙酰基转移酶(CAT)报告基因组成的重组体pAZ1009用脂质体转染至胶原产生细胞NIH/3T3细胞,讨论IFNα、IFNγ、TNFα对小鼠α2(I)型前胶原基因上游启动子活性的影响。结果:TNFα抑制小鼠α2(I)型前胶原基因启动子活性,TNFα分别与IFNγ...

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  • 核酶对人肝癌细胞多药耐药性的逆转

    ...aBI位点。设计为N2A+tRNAimet构建质粒N2A+tRNAimet-iMDRl-Rz,通过转染大肠杆菌DH5α纯化抽提质粒(Promaga,质粒抽提试剂盒),转染GP+envAMl2细胞用以病毒包装。3.HepG2细胞转染和筛选:取6孔培养板,每孔接种约8×104**HepG2细胞细胞生长...

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