【摘要】目的利用发酵含有重组质粒PET28a(+)PDC的BL21(DE3)plysS大肠杆菌,获得高效表达的M2蛋白。方法通过用3.7L发酵罐,37℃培养2.5h,溶氧控制在30%以上,4h后加入IPTG诱导表达6h,并收集菌体。溶解破菌后用安玛西亚金属螯合层析...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华实用医药杂志;2006年第6卷第12期... 根据重新测序的猪ZP3αcDNA5‘端非编码碱基数,pWR450表达质粒家族的pWR450-2被选用来表达β-半乳糖苷酶(LacZ)/ZP3α融合蛋白。带5‘端非编码区和信号顺序的全长ZP3αcDNA片段,用EcoRⅠ酶切自pZ58质粒,然后被重组插入pWR450-2质粒中被截短L...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...从流产胎儿脑组织中钓取hFGF13cDNA,将其克隆入pYEX4T-1载体质粒。在酵母细胞表达GST-hFGF13融合蛋白。以细胞增殖实验测定酵母表达蛋白粗提物的活性。结果:GST-hFGF13融合蛋白在酵母细胞中得到表达;GST-hFGF13融合蛋白能刺激NIH3T3细...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...癌细胞株SGC7901的长效影响。方法构建针对bcl2的shRNA质粒表达载体,转入SGC7901细胞,筛选稳定转染的细胞克隆继续压力培养。RTPCR方法检测稳定转染后SGC7901细胞bcl2mRNA的表达以及对细胞增殖和凋亡的影响。结果稳定...
参考资料医源资料库;在线期刊;齐鲁医学杂志;2010年第25卷第4期...奠定了基础。 1材料和方法 1.1材料pBluescript(-)质粒和DH5α菌种均由本室保存。胃癌手术切除标本,由本校西京医院普通外科提供。DNA重组所用各种限制性内切酶、T4DNA连接酶及反转录酶、RNasin,PCR反应系统(TaqDNA聚合酶...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学第三节 DNA重组实验中常用的技术 一、质粒DNA的提取及鉴定 (一)质粒DNA的提取及鉴定 1.收获细菌 (1)将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中,接入一单菌落,于37℃剧烈振荡培养过...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;实用免疫细胞与核酸...2]。 本研究设计了一对扩增CAVVP2基因的引物,通过质粒PCR将其扩增出来,并通过平端连接将其克隆于PUC119之上,并表达之,这为进一步开展CAV的分子生物学的研究和研制CAV的基因工程疫苗打下了基础。 1 材料与方法 ...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...达100%;对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验符合率为100%;用DNP标记其PCR产物,制成DNA探针,采用菌落杂交方法对12株沙门氏菌菌落进行杂交。结果显示:与PCR结果的阳性符合率...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华医药杂志;2006年第6卷第11期...其可在哺乳动物细胞中高效表达的基础上,进一步用重组质粒DNA免疫小鼠。通过间接免疫荧光法对采集的鼠血清中的病毒特异抗体进行检测。结果 用含PrM-E基因的重组质粒DNA免疫小鼠可诱导产生登革2型病毒特异的抗体,且产生...
参考资料合作平台;医学论文;临床医学与专科论文;检验医学...1.5%琼脂糖凝胶电泳鉴定RT-PCR产物。 1.5 分子克隆 质粒抽提、DNA酶切、电泳鉴定、回收、连接反应、细菌转化等均参照文献[6],略加修改进行。 1.6 DNA序列分析 采用PE310型DNA自动测序仪,进行双脱氧末端终止法自...
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