摘 要 采用HGVNS5特异的2对引物，对两个香港株和一个广东株HGV-RNA进行逆转录套式PCR扩增，PCR产物克隆入pUC19，重组质粒转化DH5α和JM109菌株。PCR和酶切法鉴定阳性克隆，双脱氧链末端终止法测定核苷酸序列并进行同源性分析。...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...智清教授构建并惠赠。pcDNA3为Invitrogen公司产品。 PCR引物设计：参考HCV-J序列〔3〕，经Oligo5.0软件辅助设计，合成内、外两组引物，在内引物对的5′端和3′端分别引入EcoRⅠ和XbaⅠ酶切位点及起始密码子和终止密码子。引物由...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...存在B细胞和T细胞抗原决定簇表位. 2.RT-PCR检测HCVRNA的引物设计.从HCV的基因结构上可以看出，HCVRNA中各个区域碱基序列的保守程度不同，其保守程度由高到低依次为:5‘UTR区C区NS3区NS4区、NS5区NS2区NS1/E2、E13‘UTR区.要对HCVRNA进...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...。方法 根据登革2型国际标准株NGC的序列，设计13对重叠引物，通过RT-PCR扩增出D2-04株不同的cDNA片段，分别克隆到pGEM-T载体，转化受体菌DH5α，挑取阳性克隆进行PCR、酶切鉴定及序列测定。结果 D2-04株的基因组全长10723个碱基，...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...。采用BHK细胞空斑实验方法进行病毒滴定，利用NS3区特异引物进行逆转录-多聚酶链反应以获NS3区基因片段，应用ABI-PRSMTM310测序系统进行序列分析。结果 在早期（感染后24～36h）细胞培养液中病毒量为106PFU/ml，在后期（感染后3...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...(RT-Nested-PCR)检测 采用RT-Nested-PCR进行检测。寡核苷酸引物根据中国人HCV基因组序列设计［2］，由复旦大学合成。外引物1:5′CTACTCCGGATCCCACaAGC3′(核苷酸位置1009-1028)；外引物2：5′GGGCTCGGAGTGAAGCAATA3′(核苷酸位置1519-1538)；内引物1...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...），含有HCVRNA5‘NCR及C区部分序列（第25～400nt）。 (2)引物设计与合成：根据中国人HCV基因组〔5〕（Ⅱ型）序列，设计合成一对引物，上游引物H1（5‘GCATCAAGCTTGCCAGCCCCCGATTGGGG GCGACACTCCACCATGAATCA3‘，50个nt）含有HindⅢ酶切位点...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...。TaqDNA聚合酶为加拿大BiostarInternationalCo.产品。 1.4 引物 P1、P2、P3根据DV-2NGC株核苷酸序列设计，由中国科学院上海细胞生物学研究所合成。P1和P2用于扩增NS3基因，P3为内引物，用于克隆的鉴定。P1：5′-gcctgcagAGCATGGTACCTGTGGGA...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...目的高效稳定地表达HCV的核心抗原。方法设计一对特异性引物，以含HCV全长基因的质粒pBRTM/HCV1-3011为模板，扩增出HCV截短的核心抗原（1－120aa）的基因，克隆于表达载体pGEX-4T3,并转化于大肠杆菌BL21,IPTG诱导HCV截短的核心抗原的表...
参考资料医源资料库；在线期刊；中华医药杂志；2006年第6卷第11期...继续用。在干扰素治疗过程中，每两周采血1次，以5＇UTR引物检测患者血清中HCVRNA以判断干扰素对清除病毒的作用，若治疗中或治疗结束时，血清中HCVRNA检测连续为阴性则认为治疗有效，为治疗反应者；否则，为干扰素治疗无反...
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