[实验目的] 1了解细胞转染技术原理和基本方法 2磷酸钙沉淀法的基本技术要点 [实验原理] 磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法,磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;细胞学技术将制备好的siRNA,siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种: 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙,RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合,沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...一个普遍的问题,就是不太可能采用单一一种试剂在各种细胞上都获得较高转染效率;因此研究者不得不尝试很多种类的转染试剂而获得特定细胞的最佳转染效果。如果某种转染试剂盒可以在各种细胞--包括那些“抗拒转染“的...
医药产业医药经济;展会&会议...如此,该技术也使疟原虫基因表达调控、药物抗性研究、细胞生物学以及疫苗的研究均出现了崭新的技术性变化。在四种感染人的疟原虫中,P.f的致病性最为严重,其研究历来倍受重视,本文就疟原虫(主要是P.f)基因转染方面...
参考资料合作平台;医学论文;基础医学论文;寄生虫学...用RNA干扰(RNAi)技术抑制卵巢上皮性癌(卵巢癌)H08910PM细胞胰岛素样生长因子1型受体(IGF1R)基因的表达,探讨IGF1R的生物学功能及对顺铂敏感性的影响。方法采用将IGF1R基因的特异性小分子干扰RNA(siRNA)、非特异性siRNA分别...
参考资料行业资讯;临床快报;肿瘤相关...靶组织给予一定条件的超声照射,可明显提高局部组织、细胞的基因转染和表达。超声靶向微泡破裂技术的应用为基因治疗提供了许多特征,包括增强基因转染效率、低毒性、低免疫原性、低侵袭性、器官特异性和超声可到达靶...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华现代妇产科学杂志;2009年第6卷第2期...为了探讨应用RNA干扰(RNAi)技术逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞多药耐药的可行性。研究者将设计合成的针对多药耐药基因MDR1的特异性小分子干扰RNA(siRNA),用脂质体转染具有MDR1基因高表达的卵巢癌紫杉醇耐药细胞株OVCAR8/TR。用荧...
参考资料行业资讯;临床快报;肿瘤相关...除RNA酶的喷剂,拭纸及液剂,检测和去除RNA酶。5.健康的细胞培养物和严格的操作确保转染的重复性 通常,健康的细胞转染效率较高。此外,较低的传代数能确保每次实验所用细胞的稳定性。为了优化实验,推荐用50代以下...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;生化与分子技术...制转染效率用途优缺点影响因素磷酸钙转染法内吞作用20%细胞被转染瞬时表达1、简单有效2、适用于贴壁、非贴壁细胞 3、常作首选方法1、Ca2+,DNA浓度2、PH值,沉淀反应时间 3、氯喹,甘油和丁酸钠处理DEAE葡聚糖转染法...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;细胞学技术...同样的模糊不清。所谓癌基因与抗癌基因都是一大类控制细胞生长和分化的基因,对其单个基因来说,它的产物具有什么功能,因细胞种类甚至细胞发育阶段而异。 1.癌基因与抗癌基因的相对意义同一种癌基因及其产物,在...
参考资料医源资料库;医源图书馆;教材类;分子生物学