...计数SGC7901细胞,以1×104个细胞/孔接种于96孔板,待细胞融合达90%以上时进行转染。每组设5个复孔,转染24、48、72h后进行MTT实验。每孔加入20μLMTT溶液(5g/L),培养箱孵育4h后吸出上清液,每孔加0.05mL二甲基亚砜(DMSO),待孔...
参考资料医源资料库;在线期刊;齐鲁医学杂志;2010年第25卷第4期...】目的用绿色荧光蛋白(GFP)反映RNA干扰(RNAi)载体的转染率,以研究RNAi载体的抑制效果。方法将GFP基因和RNAi片段(特异性针对Bcl2基因)连接至pC1载体上,构建共表达载体GFP/RNAi及其对照载体,转染293细胞,用荧光显微镜、...
参考资料医源资料库;在线期刊;滨州医学院学报;2007年第30卷第4期...病毒(recombinantadeno-associatedvirus2,rAAV-2)载体能否有效地转染NSCs。方法采用含有增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)报告基因的rAAV-2(rAAV-2/EGFP),以感染复数(multiplicityofinfection,MOI)分别为1×104、1×105、1×106转...
参考资料医源资料库;在线期刊;中华实用医药杂志;2007年第7卷第12期...在37℃、含体积分数0.05CO2培养箱中培养24h,显微镜下观察细胞融合达70%~80%时开始实验。设置阴性对照组(每孔加pshRNAsurvivinNC为3.2μg)、低浓度转染组(每孔加pshRNAsurvivin387为0.8μg)、中浓度转染组(每孔加pshRNAsurviv...
参考资料医源资料库;在线期刊;齐鲁医学杂志;2010年第25卷第4期...。方法设计合成cFLIP的ASODN,按不同浓度在脂质体介导下转染7860肾癌细胞株,设无义(NSODN)和空白对照组进行比较。观察细胞的生长状态,Westernblot检测cFLIP蛋白的表达,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测其凋亡率...
参考资料医源资料库;在线期刊;现代泌尿外科杂志;2008年第12卷第3期...功能肽与鱼精蛋白和寡核甘酸缩合物进行不同浓度配比后转染脐静脉内皮细胞,激光共聚焦显微镜下观察寡核甘酸入胞效果。结果在鱼精蛋白与寡核甘酸质量比达到1.6∶1以上时能够明显促使寡核甘酸缩合,扫描电镜下观察发现优于...
参考资料医源资料库;在线期刊;成都医学院学报;2010年第5卷第3期...设计并合成6条COX2siRNA和1条阴性对照siRNA,用3种不同的转染试剂分别转染胃癌SGC7901细胞,荧光定量PCR和Westernblotting检测胃癌SGC7901细胞中COX2基因和蛋白的表达。结果TOPtranfection能够有效介导报告基因DNA(pcDNA/lacZ)转染SGC7901细...
参考资料医源资料库;在线期刊;滨州医学院学报;2009年第32卷第1期...和功能,作为肌腱组织工程的支架有明显的优越性。基因转染技术可克服外源性细胞因子在肌腱修复处作用短暂的不足。肌腱组织工程及基因转染的前景令人鼓舞,但仍面临诸多挑战,需进一步研究。【关键词】肌腱损伤;修复...
参考资料医源资料库;在线期刊;中国矫形外科杂志;2009年第17卷第12期名称机制转染效率用途优缺点影响因素磷酸钙转染法内吞作用20%细胞被转染瞬时表达1、简单有效2、适用于贴壁、非贴壁细胞 3、常作首选方法1、Ca2+,DNA浓度2、PH值,沉淀反应时间 3、氯喹,甘油和丁酸钠处理DEAE葡聚糖...
参考资料医药经济;生物技术;实验技术;细胞学技术...重组腺相关病毒(rAAV)-绿色荧光蛋白(GFP)和rAAV-NAP,并以此转染体外培养的兔IPECs,以荧光表达来检测病毒的转染情况。对体外培养的兔IPECs进行紫外线光损伤,并用MTT法和流式细胞仪来检测NAP对兔IPECs的保护作用。结果转染了rAAV-GF...
参考资料行业资讯;临床快报;神经科