摘要综述了包涵体形成、包涵体分离和溶解、包涵体折叠复性的方法、复性产率低下的主要因素以及通过分子伴侣、低分子量添加物等的应用而提高了蛋白质复性产率。 关键词包涵体蛋白质复性 AbstractStrategiesfordecreasingth...
参考资料医药经济；生物技术；实验技术；生化与分子技术...肠杆菌中表达时，由于表达量高，往往形成无生物活性的包涵体。包涵体必须经过变性和复性的过程才能获得有活性的重组蛋白。如何提高基因重组蛋白质的复性率，是生物工程技术的一个研究热点。对近年来的重组蛋白质的复...
参考资料医药经济；生物技术；实验技术；生化与分子技术...进行SDS-PAGE诱导表达鉴定，考马斯亮蓝R-250染色。 1.2.2包涵体收集与初步纯化5000rpm，15min收集诱导后的菌体，将菌体沉淀以30ml/mg重悬于细胞超声波破碎缓冲液（50mmol/LTRIS·HClpH8.0；1mmol/LEDTA；50mmol/LNaCl；5％甘油），冰浴条...
参考资料医源资料库；在线期刊；中国热带医学杂志；2008年第8卷第8期...，每分钟释放1μmol邻硝基苯酚为1个酶活单位（U）。1.6包涵体表达的重组β半乳糖苷酶的提取和复性根据诱导表达实验结果，在37℃培养构建的3株重组菌株各500ml，加终浓度为0.4mmol/L的IPTG诱导表达8h，然后离心收集表达菌体...
参考资料医源资料库；在线期刊；成都医学院学报；2009年第4卷第2期...HisTrap试剂盒提供整套His-Tag蛋白的纯化方法。9.纯化------包涵体蛋白包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。高化学稳定性的Superose12及Sepharose6FF凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天...
参考资料药品天地；专业药学；实验技术；色谱技术；色谱入门...HisTrap试剂盒提供整套His-Tag蛋白的纯化方法。9.纯化------包涵体蛋白包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。高化学稳定性的Superose12及Sepharose6FF凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天...
参考资料药品天地；专业药学；实验技术；色谱技术；仪器介绍与操作...丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白的表达。获得的包涵体经离子交换法进行纯化，并使其在体外进行复性。采用发色底物法测定hTFPI-2对纤溶酶、胰蛋白酶的抑制作用；明胶酶谱法测定对基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase...
参考资料行业资讯；临床快报；遗传与基因组...℃预热的LB，42℃诱导6h。收集细菌，超声破碎后离心获得包涵体，用SDS-PAGE分析及WesternBlot检测。包涵体用洗涤液(2mmol／LEDTA，10mmol／LTrisCl，1％Triton—x—100，Ph8.0)洗涤3次后，加入变性液(6mol／L盐酸胍，100mmol／LThisCl，2mmol／LEDTA...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...后离心收集细菌，在冰浴中以间歇法超声破碎菌体，收集包涵体沉淀。用含4mol/L尿素的洗液反复洗涤包涵体后进行SDS-PAGE〔10〕，用Bio-RadGS-700薄层扫描仪测定重组蛋白表达率。同时进行Westernblot鉴定。 BPI23-Fcγ1重组蛋白的复性...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学...体，经序列分析证明，再转化到表达菌BL21中表达，所得包涵体经过柱纯化，复性，免疫发光分析和动物试验测定其活性。结果：经SDS-PAGE电泳在18kD左右有一条明显的新增蛋白带，与预期的分子量相符，并用Western印迹证实，rhCGβ...
参考资料合作平台；医学论文；临床医学与专科论文；检验医学